凯氏定氮法是由丹麦化学家凯道尔于1883年率先提出,由于设备要求简单,自提出后便成为蛋白质测定的经典方法,广泛运用于蛋白质检测中。凯氏定氮法通过硫酸高温消化,只能将有机氮转化为无机铵,而对于硝态氮(如硝酸盐、亚硝酸盐)则不能转化。因此凯氏定氮法适用于不含硝态氮的食品、农产品、化妆品、医药等。本文为大家详细介绍凯氏定氮法原理是什么以及凯氏定氮法的优缺点。
1、凯氏定氮法原理
凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,蛋白质含量=含氮量*6.25。
2、凯氏定氮法的优缺点
优点:
①可用于所有食品的蛋白质分析中;
②操作相对比较简单;
③实验费用较低;
④结果准确,是一种测定蛋白质的经典方法;
⑤用改进方法(微量凯氏定氮法)可测定样品中微量的蛋白质。
缺点:
①最终测定的是总有机氮,而不只是蛋白质氮;
②实验时间太长(至少需要2h才能完成);
③精度差,精度低于双缩脲法;
④所用试剂有腐蚀性。
其中采用凯氏定氮法测定蛋白质含量的仪器就是凯氏定氮仪。